Optimisation d'une Méthode HPLC pour le Dosage Simultané du Sulfaméthoxazole et du Triméthoprime dans les Comprimés de Cotrimoxazole 480 mg: Optimization of an HPLC Method for the Simultaneous Assay of Sulfamethoxazole and Trimethoprim in Cotrimoxazole 480 mg Tablets

Abstract

RÉSUMÉ
Introduction. Le cotrimoxazole, association de sulfaméthoxazole et de triméthoprime, est un antibiotique essentiel dans les pays à ressources limitées pour le traitement des infections bactériennes et la prophylaxie du pneumocystis. Le contrôle qualité de ses formulations nécessite des méthodes analytiques fiables, rapides et économes en solvants. La pharmacopée américaine (USP) propose une méthode de référence, mais son débit élevé (2 mL/min) induit une consommation importante d'acétonitrile. Cette étude visait à optimiser une méthode HPLC pour le dosage simultané du sulfaméthoxazole et du triméthoprime, réduisant le temps d'analyse et la consommation de solvants. Méthodes. Nous avons mené une étude expérimentale d'optimisation chromatographique à l'aide d'une colonne C18 (4,6 × 100 mm, 3,5 µm), avec une phase mobile eau/acétonitrile/triéthylamine (80:20:0,1 v/v, pH 5,9). Les paramètres suivants ont été modifiés pour évaluer leur impact : longueur d'onde (210-270 nm), température (25-45°C), débit (1,0-1,5 mL/min), volume d'injection (10-30 µL) et type de colonne. La méthode a été validée selon les critères de l'ICH. Résultats. La longueur d'onde optimale était 210 nm, offrant une sensibilité maximale (aires : triméthoprime = 6 230 ; sulfaméthoxazole = 9 295). La température de 35°C a été retenue (pas d'effet significatif ; p = 0,949). Le débit de 1,2 mL/min a été sélectionné comme le meilleur compromis (temps d'analyse réduit à 4 min vs 5 min pour la méthode USP, économie de 40 % d'acétonitrile). La colonne C18 4,6 × 100 mm 3,5 µm a donné les aires les plus élevées pour les deux analytes. La méthode optimisée a permis une séparation en 4 minutes avec des temps de rétention de 1,858 min (triméthoprime) et 3,742 min (sulfaméthoxazole). Conclusion. La méthode HPLC optimisée réduit le temps d'analyse de 20 % et la consommation d'acétonitrile de 40 % par rapport à la méthode USP, tout en maintenant une résolution et une sensibilité satisfaisantes. Elle constitue une alternative pertinente pour le contrôle qualité du cotrimoxazole dans les laboratoires à ressources limitées.
ABSTRACT
Introduction. Cotrimoxazole, a combination of sulfamethoxazole and trimethoprim, is an essential antibiotic in resource-limited settings for treating bacterial infections and preventing pneumocystis pneumonia. Quality control of its formulations requires reliable, fast, and solvent-efficient analytical methods. The United States Pharmacopeia (USP) provides a reference method, but its high flow rate (2 mL/min) leads to significant acetonitrile consumption. This study aimed to optimize an HPLC method for the simultaneous assay of sulfamethoxazole and trimethoprim, reducing analysis time and solvent consumption.
Methods. We conducted an experimental chromatographic optimization study using a C18 column (4.6 × 100 mm, 3.5 µm), with a mobile phase of water/acetonitrile/triethylamine (80:20:0.1 v/v, pH 5.9). The following parameters were varied to assess their impact: wavelength (210-270 nm), temperature (25-45°C), flow rate (1.0-1.5 mL/min), injection volume (10-30 µL), and column type. The method was validated according to ICH criteria.
Results. The optimal wavelength was 210 nm, providing maximum sensitivity (areas: trimethoprim = 6,230; sulfamethoxazole = 9,295). A temperature of 35°C was selected (no significant effect; p = 0.949). A flow rate of 1.2 mL/min was chosen as the best compromise (analysis time reduced to 4 min vs 5 min for USP method, 40% acetonitrile saving). The C18 4.6 × 100 mm 3.5 µm column gave the highest areas for both analytes. The optimized method achieved separation in 4 minutes with retention times of 1.858 min (trimethoprim) and 3.742 min (sulfamethoxazole).
Conclusion. The optimized HPLC method reduces analysis time by 20% and acetonitrile consumption by 40% compared to the USP method, while maintaining satisfactory resolution and sensitivity. It is a relevant alternative for cotrimoxazole quality control in resource-limited laboratories.